潔凈室（區）的檢測
本文闡述了潔凈室（區）的檢測。對潔凈室（區）級別參數塵粒最大允許數、微生物最大允數、換氣次數、照度、壓差、溫度和相對濕度進(jìn)行了實(shí)際檢測方面的歸納和總結。
獸藥GMP是指獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規范，是獸藥生產(chǎn)、質(zhì)量管理的制度和基本準則。獸藥GMP對于潔凈室（區）的空調凈化系統等硬件要求非常嚴格，潔凈級別劃分的規定亦十分明確。潔凈室（區）的潔凈級別主要用塵粒最大允許數、微生物最大允許數和換氣次數3個(gè)參數來(lái)劃分，同時(shí)對照度、壓差、溫度和相對濕度等參數也作出了具體的指導和規定。這些參數能對（區）的級別作出相應合理的、科學(xué)的驗證和監測。
下面主要闡述這些參數具體的檢測。
一、潔凈室（區）塵粒
塵粒是指一般尺寸為0.001μm～1000μm的固態(tài)和液態(tài)物質(zhì)或兩者的混合物。塵粒檢測主要采用儀器光散射法，即空氣中的懸浮粒子在光的照射下產(chǎn)生光散射現象，散射光的強度與粒子的表面積成正比。檢測時(shí)，先確認空調凈化系統是否處于正常運行狀態(tài)，換氣次數或風(fēng)速、壓差能否達到要求。然后按人流和物流的規定進(jìn)入潔凈室（區）進(jìn)行動(dòng)態(tài)或靜態(tài)檢測，并測量潔凈室（區）的面積和容積，確定采樣點(diǎn)的數目、位置和采樣量。檢測要點(diǎn)見(jiàn)表1。
塵粒采樣時(shí)還需注意：1.在確認儀器計數穩定后方可開(kāi)始連續讀數。2.采樣管必須干凈，嚴禁滲漏。3.采樣管的長(cháng)度應根據儀器的允許長(cháng)度。除另有規定外，長(cháng)度不得大于1.5m。4.計數器采樣口和儀器工作位置應處在同一氣壓和溫度下，以免產(chǎn)生測量誤差。5.須按照儀器的檢定周期，定期對儀器作檢定，以保證測試數據的可靠性。6.對于單向流，儀器采樣口的朝向應正對氣流方向，對于非單向流，采樣口宜向上。7.布置采樣點(diǎn)時(shí)，應避開(kāi)回風(fēng)口。8.采樣時(shí)，測試人員應在采樣口下風(fēng)側。
表1： 潔凈室（區）塵粒檢測要點(diǎn)
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參數指標 |
懸浮粒子 |
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檢測依據 |
JGJ71－90[1]、GB/T 16292-1996[2] |
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檢測條件 |
1.風(fēng)速或換氣次數和靜壓差達到級別要求，溫、濕度須達到規定的要求。 2.對單向流，測試應在凈化空調系統正常運行時(shí)間≥10min后開(kāi)始。 3.對非單向流，測試應在凈化空調系統正常運行時(shí)間≥30 min后開(kāi)始。 |
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采樣點(diǎn) 位 置 |
1．采樣點(diǎn)一般在離地面0.8m高度的水平面上均勻布置。 2．采樣點(diǎn)多于5點(diǎn)時(shí)，也可以在離地面0.8m～１.5m高度的區域內分層布置，但每層不少于5點(diǎn)。 |
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最少采樣點(diǎn)數目和次 數 |
1．對任何潔凈室（區），采樣點(diǎn)的數目≥2個(gè)，總采樣次數≥5次。每個(gè)采樣點(diǎn)的采樣次數可以＞1次，且不同采樣點(diǎn)的采樣次數可以不同。 2．最少采樣點(diǎn)數目可查表2。 |
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采樣量 |
最小采樣量見(jiàn)表3。 |
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結果報告 |
以檢測區域的某個(gè)采樣點(diǎn)的最大平均粒子濃度和全部采樣點(diǎn)粒子濃度平均值的95%置信上限進(jìn)行報告。 |
表2：潔凈室（區）塵粒檢測的最少采樣點(diǎn)數
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面 積m2 |
潔凈度級別 |
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100 |
10 000 |
100000或300000 |
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<10 |
2～3 |
2 |
2 |
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≥10～<20 |
4 |
2 |
2 |
|
≥20～<40 |
8 |
2 |
2 |
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≥40～<100 |
16 |
4 |
2 |
|
≥100～<200 |
40 |
10 |
3 |
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≥200～<400 |
80 |
20 |
6 |
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≥400～<1000 |
160 |
40 |
13 |
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≥1 000～<2 000 |
400 |
100 |
32 |
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2 000 |
800 |
200 |
63 |
表3 潔凈室（區）塵粒檢測的最小采樣量
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潔凈度級別 |
采樣量，L/次 |
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≥0.5μm |
≥5μm |
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100 |
5.66 |
— |
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10 000 |
2.83 |
8.5 |
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100 000或300 000 |
2.83 |
8.5 |
二、 潔凈室（區）微生物
潔凈室（區）微生物可檢測沉降菌或浮游菌。沉降菌檢測是通過(guò)自然沉降原理，收集空氣中的生物粒子于培養基平皿中，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計數，以平板培養皿中的菌落數來(lái)判定潔凈環(huán)境內的活微生物數，并以此來(lái)評定潔凈室（區）的潔凈度。浮游菌的檢測是采用計數濃度法，即通過(guò)收集懸浮在空氣中生物粒子于專(zhuān)門(mén)的培養基，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長(cháng)條件下其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計數，從而判定潔凈環(huán)境內單位體積空氣中的活微生物數，以此來(lái)評定潔凈室（區）的潔凈度。
實(shí)際檢測浮游菌和沉降菌時(shí)，先確認潔凈室（區）的檢測條件能否達到級別要求。達到要求后，測試人員和檢測儀器等按潔凈室（區）的進(jìn)出規定（如穿戴符合環(huán)境級別的工作服、紫外照射、儀器外體消毒等）進(jìn)出潔凈室（區），測試人員先測量測試區域的面積和體積，確定采樣次數和采樣點(diǎn)。浮游菌確定采樣量后按儀器操作規程操作，把空氣中懸浮的微生物采集到肉湯瓊脂培養基上。沉降菌確定采樣時(shí)間后直接把培養基裸露在空氣中，讓空氣中的微生物自動(dòng)降落在肉湯瓊脂培養基上。采樣要點(diǎn)見(jiàn)表4～7。采集完的培養基需在30℃～35℃培養箱中培養，時(shí)間≥48h。同時(shí)選定不少于3只培養基作空白對照培養。
微生物檢測時(shí)需注意：
1.檢測前應仔細檢查每個(gè)培養皿的質(zhì)量，不能使用有變質(zhì)、破損或污染的培養基和培養皿。
2.采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對樣本的污染。
3.對培養基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。
4.由于細菌種類(lèi)繁多，差別甚大，計數時(shí)一般用透射光于培養皿背面或正面仔細觀(guān)察，不要漏計培養皿邊緣生長(cháng)的菌落，并須注意細菌菌落或培養基沉淀物的區別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。
5.若在本實(shí)驗室以外的環(huán)境中進(jìn)行檢測，則培養基在整個(gè)運輸過(guò)程中必須對溫度進(jìn)行控制，培養基需放在含有冰塊的、消毒過(guò)的運輸箱內，溫度控制在0℃～4℃，并在記錄中記錄運輸溫度。
表4 潔凈室（區）浮游菌的檢測要點(diǎn)
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參數指標 |
浮游菌 |
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檢測依據 |
JGJ71－90、GB/T16293-1996[3] |
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檢測條件 |
1.風(fēng)速或換氣次數和靜壓差達到級別要求，溫、濕度須達到規定的要求。 2.浮游菌測試前，被測試潔凈室（區）已經(jīng)過(guò)消毒。 3．對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應在凈化空調系統正常運行≥10min后開(kāi)始。 4．對非單向流，如10 000級，100 000級以上的凈化房間，測試應在凈化空調系統正常運行≥30 min后開(kāi)始。 |
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采樣點(diǎn) 位 置 |
1．測點(diǎn)位置離地0.8m～1.5m左右（略高于工作面）。 2．送風(fēng)口測點(diǎn)位置離開(kāi)送風(fēng)面30cm左右。 3．可在關(guān)鍵設備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測點(diǎn)。 |
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采樣點(diǎn)數目和次數 |
浮游菌測試的最少采樣點(diǎn)數目分為日常監測及環(huán)境驗證兩種情況，見(jiàn)表5。每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。 1）對每個(gè)100級潔凈操作區域（如層流罩、層流工作臺），可在離藥物敞開(kāi)口處30cm處設測點(diǎn)，每班一次。 2）對每個(gè)10 000級潔凈工作區域（如藥物開(kāi)口工作區），可在工作面處設測點(diǎn)，每班一次。 |
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采樣量 |
采樣量根據日常監測及環(huán)境驗證確定，每次最小采樣量見(jiàn)表6。 |
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結果報告 |
以檢測區域的浮游菌最大菌落濃度（個(gè)/m3）進(jìn)行報告。 |
表5 潔凈室（區）浮游菌檢測的采樣點(diǎn)數目
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面 積 m2 |
潔 凈 度 級 別 |
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100 |
10 000 |
100 000或300 000 |
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驗證 |
監測 |
驗證 |
監測 |
驗證 |
監測 |
|
|
<10 |
2～3 |
1 |
2 |
1 |
2 |
— |
|
≥10～<20 |
4 |
2 |
2 |
1 |
2 |
— |
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≥20～<40 |
8 |
3 |
2 |
1 |
2 |
— |
|
≥40～<100 |
16 |
4 |
4 |
1 |
2 |
— |
|
≥100～<200 |
40 |
— |
10 |
— |
3 |
— |
|
≥200～<400 |
80 |
— |
20 |
— |
6 |
— |
|
400 |
160 |
— |
40 |
— |
13 |
— |
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注：1）表1中的面積，對于100級的單向流潔凈室（包括層流工作臺），指的是送風(fēng)口表面積，對于10 000級，100 000級，300 000級的非單向流潔凈室，指的是房間面積。 2）日常監測的采樣點(diǎn)數目由生產(chǎn)工藝的關(guān)鍵操作點(diǎn)來(lái)確定。 |
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表6 潔凈室（區）浮游菌檢測的最小采樣量
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潔凈度級別 |
采樣量，L/次 |
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日常監測 |
環(huán)境驗證 |
|
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100級 |
600 |
1 000 |
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10 000級 |
400 |
500 |
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100 000級 |
0 |
100 |
|
300 000級 |
0 |
100 |
表7 潔凈室（區）沉降菌的檢測要點(diǎn)
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參數指標 |
沉降菌 |
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檢測依據 |
JGJ71－90、GB/T16294-1996[4] |
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檢測條件 |
同浮游菌。 |
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采樣點(diǎn)位置 |
1．工作區采樣點(diǎn)的位置離地0.8m～1.5m左右（略高于工作面）。 2．可在關(guān)鍵設備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加采樣點(diǎn)。 |
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采樣點(diǎn)數目 |
沉降法的最少采樣點(diǎn)數可按表8確定。 |
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采樣量 |
應滿(mǎn)足最少培養皿數，見(jiàn)表9。 |
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結果報告 |
以檢測區域的最大菌落數（個(gè)/皿）進(jìn)行報告。 |
表8 潔凈室（區）沉降菌檢測的最少采樣點(diǎn)數目
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面 積m2 |
潔凈度級別 |
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100 |
10 000 |
100 000或300 000 |
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|
<10 |
2～3 |
2 |
2 |
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≥～<20 |
4 |
2 |
2 |
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≥～<40 |
8 |
2 |
2 |
|
≥40～<100 |
16 |
4 |
2 |
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≥100～<200 |
40 |
10 |
3 |
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≥200～<400 |
80 |
20 |
6 |
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≥400～<1000 |
160 |
40 |
13 |
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≥1 000～<2 000 |
400 |
100 |
32 |
|
2000 |
800 |
200 |
63 |
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注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指的是送風(fēng)面面積；對非單向流潔凈室，是指的房間面積。 |
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表9 潔凈室（區）沉降菌檢測的最少培養皿數
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潔凈度級別 |
所需φ90mm培養皿數（以沉降0.5h計） |
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100 |
14 |
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10 000 |
2 |
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100 000或300 000 |
2 |
三、潔凈室（區）風(fēng)速和換氣次數
風(fēng)速和換氣次數檢測依據為JGJ71-90。風(fēng)速、換氣次數必須首先進(jìn)行檢測，潔凈室的各項效果必須是在設計的風(fēng)速風(fēng)量條件下獲得的。以風(fēng)口截面平均風(fēng)速乘以風(fēng)口凈截面面積確定風(fēng)量。潔凈室（區）換氣次數以送風(fēng)量除以潔凈室（區）的體積來(lái)確定，從而判定潔凈室（區）是否符合級別規定，百級潔凈室（區）只需以最低風(fēng)速進(jìn)行判定。檢測要點(diǎn)見(jiàn)表10。檢測時(shí)，需注意檢測風(fēng)速宜用檢測架固定風(fēng)速儀以避免人體干擾，不得不手持風(fēng)速儀檢測時(shí)，手臂應伸直至最長(cháng)位置，使人體遠離測頭。
表10 潔凈室（區）風(fēng)速、換氣次數的檢測要點(diǎn)
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參數指標 |
風(fēng)速、換氣次數 |
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檢測條件 |
風(fēng)機運行正常，系統中各部件安裝正確，無(wú)障礙（如過(guò)濾器無(wú)被堵、擋），所有閥門(mén)固定在一定的開(kāi)啟位置上，并且必須實(shí)際測量被測風(fēng)口、風(fēng)管尺寸以及被測潔凈室（區）的體積。 |
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采樣點(diǎn)位置 |
1．單向流潔凈室：檢測截面上測點(diǎn)間距不應大于２ｍ。其中垂直單向流：檢測截面取距地面０.８ｍ的水平截面；水平單向流（層流）潔凈室：取距送風(fēng)面０.５ｍ的垂直截面。 2．亂流潔凈室：根據風(fēng)口形式可選用輔助風(fēng)管，即用硬質(zhì)板材做成與風(fēng)口內截面相同、長(cháng)度等于２倍風(fēng)口邊長(cháng)的直管段，連接于過(guò)濾器風(fēng)口外部，在輔助風(fēng)管出口平面上取采樣點(diǎn)。 |
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采樣點(diǎn)次數 |
1．單向流潔凈室：測點(diǎn)數應不少于１０個(gè)，均勻布置。 2．亂流潔凈室：按最少測點(diǎn)數不少于６點(diǎn)均勻布置測點(diǎn)。 |
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結果報告 |
百級潔凈室（區）檢測結果報告以檢測區域風(fēng)速的最低數值進(jìn)行報告。百級以上的潔凈室（區）檢測結果報告以檢測區域的總風(fēng)量數值或換氣次數的實(shí)際值進(jìn)行報告。 |
四、潔凈室（區）壓差、照度、噪聲、溫度和濕度
這些參數指標主要以JGJ71-90為檢測依據，以各檢測儀的原理進(jìn)行檢測。檢測要點(diǎn)見(jiàn)表11～14。
檢測需注意:1.噪聲檢測時(shí)，檢測人員不得發(fā)出任何有礙于結果測定的聲音（如摩擦聲，說(shuō)話(huà)聲等）。2.照度檢測時(shí)，儀器的采樣探頭不能有雜物污染，采樣時(shí)應在明亮處，不能在物體的陰影處采樣，且潔凈室（區）照度只測定除特殊局部照明之外的一般照明。
表11 潔凈室（區）靜壓差的檢測要點(diǎn)
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參數指標 |
靜 壓 差 |
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檢測條件 |
風(fēng)速或換氣次數達到級別要求，穿戴符合環(huán)境級別的工作服，在所有門(mén)關(guān)閉時(shí)進(jìn)行。 |
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采樣點(diǎn)位置 |
從潔凈室（區）最里面的房間依次向外測定，檢測高度一般可為0.8m。 |
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采樣點(diǎn)次數 |
≥1次。 |
